技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)一直是生命科學(xué)中熱門(mén)的研究領(lǐng)域。通過(guò)解析蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu),我們可以獲得很多重要的蛋白質(zhì)功能機(jī)制的信息。X射線晶體學(xué)技術(shù)是人們了解原子世界的利器,也是結(jié)構(gòu)生物學(xué)中主要的研究方法。
擁有一臺(tái)自己的蛋白質(zhì)晶體衍射儀是很多結(jié)構(gòu)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的夢(mèng)想。然而……
♦ 傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)靶蛋白質(zhì)晶體衍射儀復(fù)雜,且高昂的維護(hù)費(fèi)用,讓很多結(jié)構(gòu)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室面臨著“買(mǎi)得起,養(yǎng)不起”的苦惱。
♦ 而小分子晶體衍射儀常用的普通封閉靶光源又無(wú)法滿足結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究的需要。
♦ 此外,蛋白質(zhì)晶體的晶胞通常很大,需要大面積的探測(cè)器。影像板(IP)雖然大,但速度太慢,靈敏度太低。
♦ 而小面積的CCD和HPAD探測(cè)器不能有效率地收集高質(zhì)量,高分辨率的蛋白質(zhì)晶體衍射數(shù)據(jù)。
在科學(xué)研究追求綠色,質(zhì)量和效率的今天,結(jié)構(gòu)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室更希望擁有一臺(tái)既有高性能,又同時(shí)省心,低維護(hù)的衍射儀。
Bruker公司一直致力于為晶體學(xué)工作者提供好的科研助手,想客戶所需,予客戶所求。新一代的D8 VENTURE- IμS PHOTON III在保證蛋白質(zhì)晶體學(xué)研究所需高性能的同時(shí),零維護(hù)的特點(diǎn)大大降低了您后期的擁有成本,讓您真正擁有一臺(tái)省心,強(qiáng)大的科研助手。
▲D8 VENTURE
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D8 VENTURE-IμS PHOTON III的特點(diǎn)
♦ 零維護(hù),光強(qiáng)度接近微焦斑轉(zhuǎn)靶的IμS3.0 微焦斑光源
♦ 零維護(hù),光強(qiáng)度超越微焦斑轉(zhuǎn)靶的IμS Diamond微焦斑光源
♦ 媲美同步輻射探測(cè)器性能的混合光子計(jì)數(shù)型探測(cè)器PHOTONIII
♦ 高精度的Kappa測(cè)角儀,采集更多有效的SAD衍射數(shù)據(jù)
♦ 整機(jī)無(wú)任何水冷部件,安全性高
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PHOTON III 混合計(jì)數(shù)探測(cè)器(MMPAD)
——更接近完美的光子計(jì)數(shù)模式
1.在像素陣列探測(cè)器中,光子計(jì)數(shù)模式和電荷積分模式都有各自的優(yōu)勢(shì):
2.光子計(jì)數(shù)模式對(duì)弱衍射點(diǎn)檢測(cè)優(yōu)化,計(jì)數(shù)沒(méi)有讀取噪音;
3.電荷積分模式對(duì)強(qiáng)衍射點(diǎn)計(jì)數(shù)更準(zhǔn),是好的計(jì)數(shù)模式。
那PHOTONIII又是怎樣的呢?
♦ PHOTONIII是開(kāi)始采用了混合計(jì)數(shù)模式的探測(cè)器,同時(shí)具有兩種模式:弱衍射點(diǎn)采用光子計(jì)數(shù),強(qiáng)衍射點(diǎn)采用積分模式。
♦ *的計(jì)數(shù)模式使得PHOTONIII不僅擁有量子極限的靈敏度,準(zhǔn)確采集極弱的衍射信號(hào),而且沒(méi)有傳統(tǒng)的HPAD探測(cè)器電荷分享噪音以及計(jì)數(shù)頻率飽和等問(wèn)題。
不僅如此,PHOTON III是目前室內(nèi)衍射儀大的像素陣列探測(cè)器,20 × 14 cm2 ,是傳統(tǒng)的HPAD探測(cè)器面積的5倍。超大的有效面積可以大大提高蛋白晶體衍射數(shù)據(jù)收集的速度,確保蛋白晶體衍射點(diǎn)的有效分離,兼顧到完整度和冗余度,達(dá)到高的數(shù)據(jù)收集效率和質(zhì)量。
▲Photon III and frames
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IµS3.0 和 IµS DIAMOND 光源,*的穩(wěn)定性
專門(mén)為晶體學(xué)設(shè)計(jì)的IµS3.0 和 IµS DIAMOND光源,革命性地將微焦斑固定靶光源的強(qiáng)度提升到了微焦斑轉(zhuǎn)靶的水平,*日常蛋白質(zhì)晶體篩選和測(cè)試的需要。而且更重要的是,*風(fēng)冷的設(shè)計(jì),大大延長(zhǎng)了光源的使用壽命,賦予了IµS3.0 和 IµS DIAMOND*的穩(wěn)定性,讓您不必再為高昂的維護(hù)費(fèi)用而煩惱。
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實(shí)驗(yàn)案例:
50µm的小晶體,1小時(shí)獲得高質(zhì)量的SAD數(shù)據(jù)解析結(jié)構(gòu)
溶菌酶晶體通常用于測(cè)試儀器的性能。
♦ 我們挑選了一顆很小的溶菌酶晶體(25 µm × 50 µm × 65 µm)在D8 VENTURE-IµS 3.0 PHOTON III儀器上進(jìn)行測(cè)試。
♦ 曝光時(shí)間僅為10s/0.3°。
盡管晶體很小,曝光時(shí)間很短,我們還是能夠在2theta= 0度的條件下,僅用了一小時(shí)(IµS DIAMOND可只用0.5 h),收集到1.5A分辨率的數(shù)據(jù),并且使用SAD法快速解析了晶體結(jié)構(gòu)。而傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)晶體衍射儀,需要6 h以上才能完成類似的工作。
通常室內(nèi)衍射儀S的SAD數(shù)據(jù)需要收集到很高的冗余度(> 10),提高數(shù)據(jù)采集的精度,才能獲得有效的反常散射信號(hào)。而本數(shù)據(jù)中冗余度很低,依然能夠順利地用S原子的反常散射信號(hào)解析結(jié)構(gòu)。這表明PHOTON III混合計(jì)數(shù)模式在數(shù)據(jù)采集精度上具有*的優(yōu)勢(shì):同時(shí)準(zhǔn)確測(cè)量弱衍射點(diǎn)和強(qiáng)衍射點(diǎn),沒(méi)有電荷分享噪音。
D8 VENTURE-IμS PHOTON III蛋白晶體衍射儀將高性能和零維護(hù)綜合在一起。
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